生物安全柜是一種在微生物學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、基因重組、動物實驗、生物制品等領(lǐng)域的科研、教學(xué)、臨床檢驗和生產(chǎn)中廣泛使用的安全設(shè)備, 也是實驗室生物安全中一級防護(hù)屏障中最基本的安全防護(hù)設(shè)備。
生物安全柜的功能、用途、結(jié)構(gòu)、排氣系統(tǒng)和/或供氣系統(tǒng)(高效粒子空氣濾器),以及實驗室選擇生物安全柜的基本原則、安裝原則和要求、實驗室操作程序、日常維護(hù)要求等內(nèi)容。這些內(nèi)容是實際使用和操作生物安全柜時必須掌握的知識。
大多數(shù)實驗室工作人員對生物安全柜的性能、選擇、操作和維護(hù)等方面的知識非常缺乏,常常混淆生物安全柜與超凈工作臺這兩種設(shè)備。其實兩者之間是有本質(zhì)區(qū)別的,生物安全柜是一種負(fù)壓的凈化工作臺,正確操作生物安全柜,能夠*保護(hù)工作人員、受試樣品并防止交叉污染的發(fā)生;而超凈工作臺只是保護(hù)操作對象而不保護(hù)工作人員和實驗室環(huán)境的潔凈工作臺。因此,在微生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的科研、教學(xué)、臨床檢驗和生產(chǎn)中,應(yīng)該選擇和使用生物安全柜,而不能夠選擇和使用超凈工作臺。
生物安全柜設(shè)計、生產(chǎn)和檢測驗證中使用的各種術(shù)語和定義、 分類、設(shè)計、結(jié)構(gòu)和性能的基本要求、試驗方法、檢驗規(guī)則、標(biāo)志、標(biāo)簽和說明書、包裝、運輸和貯存的要求、檢測驗證方法、檢測儀器的選擇和校準(zhǔn)、產(chǎn)品出廠檢驗要求、現(xiàn)場檢驗要求等。
根據(jù)生物安全防護(hù)水平的差異,生物安全柜可分為一級、二級和三級三種類型。一級生物安全柜可保護(hù)工作人員和環(huán)境而不保護(hù)樣品。其氣流原理和實驗室通風(fēng)櫥基本相同,不同之處在于排氣口安裝有 HEPA 過濾器,將外排氣流過濾進(jìn)而防止微生物氣溶膠擴(kuò)散造成污染。一級生物安全柜本身無風(fēng)機(jī),依賴外接通風(fēng)管中的風(fēng)機(jī)帶動氣流,由于不能保護(hù)柜內(nèi)產(chǎn)品,目前已較少使用。
超凈工作臺,為了保護(hù)實驗材料而設(shè)計的,通過風(fēng)機(jī)將空氣吸入預(yù)過濾器,經(jīng)由靜壓箱進(jìn)入高效過濾器過濾,將過濾后的空氣以垂直或水平氣流的狀態(tài)送出,使操作區(qū)域達(dá)到百級潔凈度,保證生產(chǎn)對環(huán)境潔凈度的要求。
超凈工作臺只能保護(hù)樣品,不保護(hù)操作人員。
從潔凈級別看,生物安全柜也比超凈工作臺高級。
超凈臺的優(yōu)點是操作方便自如,比較舒適,工作效率高,預(yù)備時間短,開機(jī)10分鐘以上即可操作,基本上可隨時使用。在工廠化生產(chǎn)中,接種工作量很大,需要經(jīng)常長久地工作時,超凈臺是很理想的設(shè)備。
超凈臺由三相電機(jī)作鼓風(fēng)動力,功率145~260W左右,將空氣通過由特制的微孔泡沫塑料片層疊合組成的“超級濾清器"后吹送出來,形成連續(xù)不斷的無塵無菌的超凈空氣層流,即所謂“高效的特殊空氣",它除去了大于0.3 μm的塵埃、真菌和細(xì)菌孢子等等。超凈空氣的流速為24~30m/min,這已足夠防止附近空氣可能襲擾而引起的污染,這樣的流速也不會妨礙采用酒精燈、本生燈或電子火焰滅菌器對器械等的灼燒消毒。
工作人員就在這樣的無菌條件下操作,保證無菌材料在轉(zhuǎn)移接種過程中不受污染。但是萬一操作中途遇到停電,暴露在未過濾空氣中的材料便難以避免污染。這時應(yīng)迅速結(jié)束工作,并在瓶上作出記號,內(nèi)中的材料如處于增殖階段,則以后不再用作增殖而轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)。如為一般性生產(chǎn)材料,因其極其豐富也可棄去。如處于生根過程,則可留待以后種植用。
超凈工作臺的使用管理
(1) 每次使用超凈工作臺時, 實驗人員應(yīng)先開啟超凈工作臺上的紫外燈, 紫外照射20分鐘后使用。
(2) 開啟超凈工作臺工作電源,關(guān)閉紫外燈,并用75%的酒精或0.5%過氧乙酸噴灑擦拭消毒工作臺面。
(3)整個實驗過程中,實驗人員應(yīng)按照無菌操作規(guī)程操作。
(4)實驗結(jié)束后, 用消毒液擦拭工作臺面, 關(guān)閉工作電源, 重新開啟紫外燈照射15分鐘。
(5)如遇機(jī)組發(fā)生故障,應(yīng)立即通知動物實驗室,由專業(yè)人員檢修合格后繼續(xù)使用。
(6)實驗人員應(yīng)注意保持室內(nèi)整潔。
(7)超凈工作臺的濾材每2年更換一次,并作好更換記錄。